Saturs
Mikrobiologi, izmantojot mikroskopu, pēta mikroorganismu, piemēram, aļģu, baktēriju, vienšūņu, sēnīšu un vīrusu, īpašības. Lai gan daži organismi, piemēram, vienšūņi un rauga šūnas, ir viegli saskatāmi caur slaidiem, baktēriju šūnas prasa krāsošanu. Lai uzlabotu baktēriju šūnu un šūnu struktūru vizualizāciju, zinātnieki ir izstrādājuši vairākas metodes, piemēram, Grama krāsošanas tehniku, skābei izturīgu krāsošanu un fluorescējošu krāsošanu. Izmantojot šādas krāsošanas metodes, ir iespējams noteikt strukturālās īpašības, kas palīdz klasificēt baktērijas.
Labāka apskate
Baktēriju organismi ir tik mazi, ka lielākā daļa no tiem ir redzami tikai zem mikroskopa ar palielinājuma jaudu 1000 reizes. Tomēr vienkāršs izmēra palielinājums nenodrošina pietiekamu skaidrības pakāpi, tāpēc baktērijas pirms novērošanas ir jāiekrāso, lai nodrošinātu vizualizēšanai nepieciešamo skaidrību.
Identifikācija un klasifikācija
Krāsojošās baktērijas, lai atšķirtu baktēriju tipus, ir pazīstama kā diferenciālā krāsošana. Grama traips ir diferenciāls traips, kas atšķir baktērijas atkarībā no šūnu sienas satura. Šajā metodē baktēriju šūnas reaģē ar kristālvioletu krāsu, lai kļūtu violets. Pievienojot balinātāju, dažas baktēriju šūnas zaudē savu krāsu, bet citas - nē. Pievienojot safranīna krāsu, krāsas krāsas šūnas kļūst sarkanas, savukārt baktēriju šūnas, kas nezaudē krāsu, paliek violets. Šūnas, kas kļūst sarkanas, sauc par gramnegatīviem organismiem, un šūnas, kas nekļūst sarkanas, klasificē kā gram-pozitīvos organismus. Grama krāsošanas tehnika nodrošina ātru metodi infekcijās iesaistīto baktēriju sākotnējai identificēšanai. Tāpat arī skābes izturīgais krāsošanas process palīdz īpaši identificēt organismus, kas pieder baktēriju klasei, ko sauc par mikobaktērijām, piemēram, Mycobacterium tuberculosis.
Priekšizpēte
Baktēriju kultūru paraugos bieži ir svarīgi noteikt dzīvu baktēriju šūnu klātbūtni. Tādas metodes kā fluorescējoša krāsošana palīdz noteikt, vai šūnu kultivēšana ir dzīvotspējīga. Dzīvas baktērijas spēj pārvērst tetrazola 5-ciān-2,3-ditolilhlorīdu (CTC) krāsā, kurai ir sarkana fluorescence. Tāpēc, kad CTC krāsas kultūras izstaro šīs fluorescences, tas norāda uz dzīvotspējīgu baktēriju klātbūtni. Propīdija jodīds ir traips, kas iedarbojas tikai uz nedzīvām šūnām, kurām ir bojātas membrānas, un tāpēc ir noderīgs, lai identificētu mirušās baktēriju šūnas.
Šūnu struktūru identifikācija
Krāsošana nodrošina skaidru dažādu šūnu struktūru vizualizācijas metodi. Piemēram, Feulgena krāsošanas metode ļauj identificēt kodolu baktēriju šūnās, savukārt Alberta krāsošana ir noderīga metahromatisko granulu vizualizācijā. Tāpat sudraba impregnēšanas tehnika ļauj identificēt spirohetes. Flagellas ir viegli novērojamas, ja tās ir nokrāsotas ar Ryu krāsojumu. Malahīta zaļā krāsošana palīdz identificēt baktēriju sporas.
