Saturs
Pētījumos ar mikrobu kultūrām bieži nepieciešams identificēt tajos esošos organismus. Kad nelielu kultūras daļu ievada agarā, kas satur barības vielu, baktēriju masu ir iespējams atdalīt atsevišķās koloniju veidojošās vienībās. Katra no šīm vienībām attīstās atsevišķās kolonijās, kurām piemīt īpašības, kas palīdz identificēt organismu.
Mērķis
Mikrobioloģijas pētījumiem nepieciešams izpētīt noteiktu organismu morfoloģiju. Dažos gadījumos jauktā kultūrā esošie organismi pirms to analīzes ir jānošķir. Tādējādi ir svarīgi izolēt šīs mikrobu kolonijas. Baktēriju kultūras vienā pilienā satur lielu skaitu šūnu. Sēšana, iztukšojot uz agara plāksnes, tos atšķaida tā, ka atsevišķā plāksnes vietā nogulsnējas viena baktēriju šūna. Vairākas no šīm atsevišķajām šūnām ir atdalītas ar dažiem milimetriem starp tām. Katra no tām sadalās, veidojot tūkstošiem jaunu šūnu, radot izolētas kolonijas.
Princips
Agara plāksne nodrošina barības vielām bagātu barotni, kas stimulē mikroorganismu augšanu un vairošanos. Notekūdeņu sēšanai tiek izmantota kvadrantu striation metode, kurā visa plāksne ir sadalīta četros kvadrantos. Pārejot no viena kvadranta uz otru, pakāpeniski tiek atšķaidīta sākotnējā kultūra pa visu pieejamo virsmu. Kvadrants, kurā sākat, parāda blīvu un nenošķirtu mikrobu augšanu, kas izskatās kā mikroorganismu paklājs, bet pēdējā - izolētas kolonijas.
Materiāli
Izplūdes sēklām ir nepieciešamas barības agara plāksnes, cilpa inokulācijai, baktēriju kultūra, dezinfekcijas šķīdums, piemēram, Lysol 10%, un Bunsen deglis. Jums būs nepieciešami arī drošības aprīkojums, piemēram, priekšauts, cimdi un aizsargbrilles. Sējums striju veidošanai tiek izgatavots no baktēriju kultūras, izmantojot cilpu un saskrāpējot barības agara plāksnes. Bunsen deglis ir paredzēts roktura liesmošanai rievu laikā. Pirms eksperimenta sākšanas izmantojiet dezinfekcijas šķīdumu, lai notīrītu virsmu.
Metode
Izmantojiet nelielu daudzumu sējmateriāla, lai sētu pirmajā kvadrantā ar kustību uz priekšu un atpakaļ. Uzliesmojiet rokturi un ļaujiet tam atdzist, pieskaroties tai neinokulētajai agara plāksnes daļai. Pieskarieties tam tikko iesētās platības vienam galam un izstiepiet to no turienes līdz otrajam kvadrantam. Liesmojiet un atkal atdzesējiet cilpu, un no otrā laukuma strādājiet ar trešo kvadrantu. Atkārtojiet to pašu procesu ar ceturto kvadrantu.
